1、進(jìn)行接種操作的相對(duì)潔凈區(qū)域或房間叫無菌室或叫接種室。無菌室達(dá)到—定的無菌程度，面積—般4—6平方米，高度2—2.2米。室內(nèi)地面、墻壁平整光滑，水泥墻面涂刷油漆或防水、防霉涂料，也可裝貼塑面板和殺菌瓷面磚。無菌室的門要和工作臺(tái)保持—定距離，通常采用左右移動(dòng)拉門，有條件裝用超凈工作臺(tái)，效果更好。 

    以化學(xué)滅菌消毒的無菌室稱為化學(xué)滅菌無菌室。食用菌栽培大多數(shù)采用這類無菌室。用過濾空氣凈化環(huán)境的無菌室用于機(jī)械、物理滅菌無菌室，也稱潔凈室。潔凈氣流分層流式和亂流式兩種，亂流式潔凈級(jí)別低，用于工業(yè)生產(chǎn)。食用菌接種室常在舊建筑上改造，需增添有技術(shù)走廊的亂流潔凈室。一般工作區(qū)要求空氣潔凈度達(dá)到100級(jí)，溫度23-25℃，相對(duì)濕度50-65％，水平層流速度0.3-0.5米／秒。 

    2、無菌室使用注意事項(xiàng) 

    （1）使用前 ①用紫外線滅菌15-30分鐘，或用5％石碳酸、3％煤酚皂液噴霧后，再開紫外線燈滅菌；②用富爾馬林—甲醛熏蒸；③用臭氧發(fā)生器殺菌30分鐘后。三種方法交替使用，效果更好。一般使用10-30天后，再滅菌一次。應(yīng)特別重視進(jìn)入無菌室前的人身凈化和熟悉操作要求。 

    （2）滅菌效果檢驗(yàn) 方法是在室內(nèi)一定高度放置若干葡萄糖瓊脂培養(yǎng)叢玻璃皿，順次打開皿蓋5分鐘，然后蓋上皿蓋，連同對(duì)照的玻璃皿一起放置到溫度為30℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3天，觀察菌落數(shù)。每個(gè)玻璃皿內(nèi)雜菌落數(shù)超過3個(gè)為不合格。若有不合格的，應(yīng)檢查重來，直到合格為止。 

    3、紫外線滅菌燈 

    用于滅菌的紫外線燈光裝置叫紫外線滅菌燈。紫外線分長波紫外線和短波紫外線，長波紫外線用于保健治療，短波紫外線用于滅菌。 

    （1）滅菌原理。紫外線滅菌是當(dāng)微生物菌體被紫外線照射并吸收了紫外線后，引起細(xì)胞內(nèi)的氨基酸、原漿蛋白、酯的化學(xué)變化，使細(xì)胞變性，從而導(dǎo)致細(xì)菌死亡。 

    （2）使用注意事項(xiàng)。紫外線屬低能量的電磁輻射，穿透力很差，影響紫外線滅菌的因素有： 

    ①空氣中的塵粒與濕度。當(dāng)空氣中含800-900個(gè)／立方米塵粒時(shí)，滅菌效果降低20-30％；當(dāng)相對(duì)濕度由33％增至56％時(shí)，滅菌效果減為原來的1／3。 

    ②環(huán)境溫度。大多數(shù)燈管設(shè)計(jì)在25-40℃條件工作，如果外界溫度由27℃減低到4℃時(shí)，輸出能量要減低65-80％。 

    ③紫外線對(duì)固體的穿透力。凡可見光不能穿透的物質(zhì)，紫外線亦不能穿透，對(duì)聚氯乙烯薄膜開始可以透過30％以上，但是經(jīng)6小時(shí)照射后，由于薄膜變性透過率<3％，因此，用紫外線滅菌、消毒僅限于被照射的物體表面和空氣。 

    ④紫外線管要保持清潔。燈管上的灰污、油漬會(huì)減弱紫外線輻射量，應(yīng)經(jīng)常用酒精紗布擦凈，擦后也不能觸摸。燈管壽命約2000小時(shí)，必須定時(shí)更換。一般10-30平方米的房間需30瓦燈一支，照射30分鐘后，掛上遮光布30分鐘則效果更好，也防止對(duì)人體的危害。 

    4、臭氧發(fā)生器。紫外線照射空氣后會(huì)產(chǎn)生臭氧，產(chǎn)生臭氧的設(shè)備稱為臭氧發(fā)生器。 

    （1）滅菌機(jī)理。臭氧能使有機(jī)物氧化分解，是很有效的滅菌劑。臭氧滅菌的氣體擴(kuò)散作用，對(duì)密閉的箱室內(nèi)部無滅菌死角，所以滅菌速度比紫外線快1-2倍，比藥物快8-12倍。臭氧滅菌無殘毒，只需30-40分鐘臭氧就能自行還原成氧氣。對(duì)食用菌的生長和生育抑制也有效。 

    （2）常用機(jī)型。國產(chǎn)常用的臭氧滅菌器有FCY系列環(huán)境消毒滅菌器和MQ系列消毒滅菌器。SS-2801系列空氣凈化器屬于空氣高壓電暈放電產(chǎn)生負(fù)離子和臭氧的設(shè)備，風(fēng)速為1-2米／秒，適用于為接種室提供滅菌空氣、菇房滅菌、食品短期保鮮、人防工程空氣凈化等。